一、各类样本的推荐送样量
1. 动物组织
1)常规动物组织
磷酸化修饰:单份>30 mg
酰化类修饰(乳酸/泛素/乙酰/琥珀酰化):单份>100 mg
2)坚硬组织(软骨、毛发):暂不接收
2. 植物组织
1)柔软植物组织(叶片、花瓣等)
磷酸化:>600 mg
酰化修饰:>5 g
2)坚硬植物组织(根、树皮、枝条、果实、种子)
磷酸化:暂不接收
酰化修饰:>10 g
3.微生物(细菌、真菌菌体沉淀)
磷酸化:菌体沉淀体积>50 μL
酰化修饰:菌体沉淀体积>500 μL
4.培养细胞(贴壁/悬浮细胞)
磷酸化:≥5×10⁶个细胞,或50 μL细胞沉淀
酰化修饰:≥2×10⁷个细胞,或200 μL细胞沉淀(约8盘10 cm培养皿细胞量)
5.液体类样本(淋巴液、关节液、唾液、乳汁、腹水等)
磷酸化:单份>1 mL
酰化修饰:单份>50 mL
重要说明:血浆、细胞上清目前暂不开展修饰组检测,不接收。
6.蛋白溶液(已提取好的总蛋白)
磷酸化:蛋白总量>600 μg
酰化修饰:蛋白总量>4 mg
二、样本保存与运输要求
1.样本离体后立即液氮速冻,全程添加蛋白酶抑制剂、去修饰酶抑制剂,防止蛋白降解、修饰基团丢失;
2.长期存放置于-80℃超低温冰箱,严禁反复冻融;
3.寄送全程干冰低温运输,保证样本不解冻。
三、样本质控与预处理要求
1.动物/植物组织:剔除脂肪、结缔组织、木质化杂质,切碎后速冻;
2.细胞样本:弃培养基,PBS清洗2–3次,离心收集细胞沉淀后速冻;
3.液体样本:去除细胞碎片、油脂杂质,分装速冻;
4.坚硬组织(软骨、毛发)不建议送样,磷酸化修饰不接收木质化植物硬组织。
